Resumen:
La poli(ADP-ribosil)ación es una modificación postraduccional catalizada por la
poli(ADP-ribosa) polimerasa (PARP). Como modificación reversible, está regulada por un
delicado equilibrio de síntesis y degradación, y participa en varios procesos nucleares
relacionados con el metabolismo del ADN. Para adaptarse a su complejo ciclo de vida, T. cruzi,
el agente etiológico de la enfermedad de Chagas, pasa por varios procesos de diferenciación
como la metaciclogénesis, donde el epimastigote replicativo se transforma en la forma infectiva
conocida como tripomastigote metacíclico. En este trabajo evaluamos el rol de TcPARP durante
la metaciclogénesis de T. cruzi utilizando Olaparib, un inhibidor específico de PARP, con dos
técnicas de diferenciación: en medio TAU-TAU 3AAG y en agar sangre. Nuestros resultados,
utilizando dos cepas diferentes de T. cruzi muestran que, dependiendo de la técnica de
diferenciación utilizada, la inhibición de TcPARP estimula o interfiere con la metaciclogénesis.
A su vez se determinó que, durante el proceso de diferenciación, los epimastigotes presentan
una gran cantidad de PAR distribuido homogéneamente por todo el citoplasma, mientras que
los tripomastigotes metacíclicos presentan una cantidad considerablemente menor, o incluso
nula, de dicho polímero. También comparamos la formación de autofagosomas y especies
reactivas de oxígeno (ROS) durante la inducción de metaciclogénesis con el fin de comprender
las vías que se desencadenan en este proceso. Los resultados preliminares indican que, aunque
la autofagia no estaría relacionada con las diferencias observadas en TAU-TAU 3AAG, la
formación de ROS podría estar desencadenando la metaciclogénesis en agar sangre. Con el fin
de estudiar la importancia de TcPARP en el establecimiento de la infección, se generó con éxito
una línea TcPARP knockout mediante el sistema CRISPR/Cas9 que servirá como herramienta fundamental para futuros estudios
