Análisis funcional de RAPA2, una lectina secretada por Rhizobium leguminosarum, involucrada en la formación de biofilms

Abstract

En este trabajo nos propusimos dividir a RapA2 en sus dos dominios y estudiarlos como proteínas individuales; evaluando su capacidad de unir calcio, sus características estructurales y si conservan la actividad lectina utilizando como sustrato el EPS. Los dominios fueron analizados estructuralmente por espectroscopia CD, y en un ensayo funcional de inhibición del binding (BIA) con el EPS. Además, obtuvimos una proteína de fusión con GFP de la proteína RapA2 completa, con el objetivo de desarrollar una herramienta que a futuro permita estudiar el desarrollo de la matriz durante la formación de biofilms. Nuestros resultados muestran que la actividad lectina se limita al dominio carboxilo terminal de RapA2, que contiene el sitio de unión a calcio y es capaz de unirse al EPS aunque con menor afinidad que la lectina RapA2 completa