Implicancia de la enzima Acil-CoA Sintetasa 4 (ACSL4) en la resistencia a drogas quimioterapéuticas y regulación de proteínas transportadoras dependientes de energía en líneas celulares de cáncer de mama

Abstract

Acil-CoA sintetasa-4 (ACSL4) es una enzima implicada en la regulación negativa del receptor de estrógeno α (ERα) y en la resistencia a la hormonoterapia en cáncer de mama. Los tratamientos quimioterapéuticos de cáncer de mama metastásicos usualmente se enfrentan con el problema de la resistencia a la terapia asociada a la expresión de proteínas ABC (ATPbinding cassette). Estas proteínas transportadoras se caracterizan por sensar y expulsar, mediante ATP, drogas oncológicas a través de la membrana celular. En este contexto, el objetivo central de este trabajo es estudiar el rol de ACSL4 en la resistencia a tratamientos quimioterapéuticos y la relación con los transportadores ABC en los mecanismos subyacentes. Para ello, se usaron como modelo biológico las líneas celulares inmortalizadas de cáncer de mama MDA-MB-231 wt (silvestres) y líneas modificadas genéticamente, MCF-7 Tet-Off/ ACSL4 y MDA-MB-231 mock, que sobreexpresan ACSL4 respecto a las líneas MCF-7 Tet-Off vector vacío y MDA-MB-231 shRNA ACSL4. Se llevaron a cabo ensayos de viabilidad celular (MTT), proliferación celular (BrdU), exflujo de fármacos (citometría de flujo y microscopía de epifluorescencia), identificación de genes transportadores ABC de resistencia a fármacos que responden a ACSL4 (RNA-Seq), expresión del ARNm de los transportadores identificados, los niveles de proteínas y la participación de la vía de señalización (PCR en tiempo real y Western blot).