Caracterización de las isoformas T cDOT1a y T cDOT1b e implicancia de la metilación diferencial de H3K76 en los distintos estadios del ciclo de vida de Trypanosoma Cruzi

Abstract

En este proyecto, investigamos la relevancia de TcDot1a y TcDot1b durante el ciclo celular y el proceso de metaciclogénesis en T. cruzi y el potencial rol epigenético de la metilación diferencial de H3K76. Por un lado, para evaluar la actividad catalítica mediante complementación heteróloga, previamente en el laboratorio, se clonó y transformó con éxito una cepa de levadura mutante para Dot1 (dot1Δ) con TcDot1a. Por otro lado, para analizar la ubicación subcelular de las isoformas y sus efectos sobre la progresión del ciclo celular, y la diferenciación, hemos clonado las isoformas TcDot1 en el vector pRIBOTEX, con una etiqueta HA en el extremo N-terminal, y transfectado epimastigotes de la cepa CL Brener.